医学基础-免疫丨三种专职性APC的功能特点

三种专职性APC的功能特点

一、树突细胞(DCs)

• 唯一能够诱导初次免疫反应的细胞
• DCs表达丰富的免疫识别受体，能够敏感地识别、摄取抗原，经加工、处理将抗原提呈给淋巴细胞，参与T细胞免疫耐受的形成，并影响适应性免疫应答的类型。

1.DCs的发育

树突状细胞（DC）从造血干细胞（HSC）发展而来，这是一个从骨髓开始的多步骤过程。大多数DC均通过一种共同的DC祖细胞（CDP）而生成，这种祖细胞以fms样酪氨酸激酶3 （FLT3）配体依赖的方式分化为传统的DC前体细胞（pre-cDC）和浆细胞样DC前体细胞（pre-pDC）。骨髓中仍然存在E2-2依赖的pDC分化，而两种传统DC均来自外周淋巴组织中的pre-cDC。cDC1的发育依赖于碱性亮氨酸拉链ATF样转录因子3（BATF3），cDC2的发育受几种转录因子调节，包括干扰素调节因子4 （IRF4）。在某些条件下，单核细胞可分化为MC，以补充经典DC。

2.Dcs的亚群

经典树突细胞(cDC)

2014年，提出了一个传统或经典（cDC）亚群的统一分类系统，以消除越来越多的组织和物种特定亚群名称所引起的歧义。根据这一惯例，将两个主要亚群描述为经典1型DC（cDC1）和经典2型DC（cDC2）。cDC2细胞具一般DC家族的一般功能，并通过MH II类抗原呈递以及共刺激活化Naive CD4+ T细胞。cDC1细胞专门用于交叉提呈，或在MHC I类上提呈外源抗原，以诱导Naive CD8+ T细胞分化为细胞毒性T淋巴细胞（CTL）。与其特异性一致，cDC1和cDC2细胞也可表达活化CD4+ 或CD8+ 效应T细胞功能所需的细胞因子。cDC2驱动的辅助性T细胞极化会导致对细胞外病原体（包括微生物和蠕虫感染）的强烈适应性免疫反应。CD8+ T细胞的交叉启动能力保证cDC1能够指导CTL对细胞内病原体和肿瘤做出反应。值得注意的是，1868年，保罗·朗格罕（Paul Langerhans）根据其巨噬细胞样胚胎起源的揭示，把典型DC朗格汉斯细胞（LC）重新归类为巨噬细胞。。

cDC可通过其分支状“树突状”形态和cDC特征基因(包括CD11c和MHC II类(HLA-DR in human))的高表达来与其他单核吞噬细胞区别。CD8或CD103所存在的组织决定了小鼠cDC1细胞的分类，除了常见的cDC标志物外，还可通过CD11b的表达来区分鼠cDC2细胞（表1）。 可以通过人cDC1细胞各自表达的BDCA1和BDCA3以及其他标志物来将其与cDC2区分开来。由于moDC和某些巨噬细胞难以与CDC区分开来，因此区分典型的单核细胞/巨噬细胞标志物物（如Ly6C和F4/80）以及某些标志物（如CD64、MAR-1、MerTK和CD88）的差异表达，将有助于将CDC与其他细胞类型区分开来。

图2.经典树突状（cDC）细胞刺激CD4+ T细胞和CD8+ T细胞 活化的经典树突状细胞（cDC）到次级淋巴组织的T细胞区通过MHC II提呈抗原以刺激CD4+ T细胞。cDC还可通过经典和交叉提呈途径刺激CD8+ T细胞。

浆细胞样树突状细胞（pDC）

浆细胞样树突状细胞是树突状细胞的一个独特亚群，其具有分泌I型IFN的特殊功能。它们可表达高水平的转录因子IRF7和内体TLR，这使得它们能够快速分泌大量IFNα和β来应对病毒感染。从表型上区分，可以通过pDC分泌时的形态（与浆细胞类似）、CD11c和MHC II类等cDC特征基因的非典型表达以及特异性pDC标志物的检测来区别pDC与CDc（表1）。虽然在鼠pDC上检测到了中等表达水平的CD11c，但在人树突状细胞上没有发现CD11c。相反，通过人CD123和CD303的表达以及小鼠Bt2和B220的表达，可将pDC与cDC区分开来。

pDC的发育依赖于E蛋白转录因子E2-2的调节。与cDC一样，已证明pDC及其前体对Flt3配体信号具有依赖性。除了它们独特的表型，pDC还可表达淋巴谱系的一些特征，因为其对转录因子E2-2具有依赖性。E2-2属于E蛋白家族的调节剂，已知对淋巴系谱系定性型不可或缺。最近，单细胞转录分析再次表明，部分pDC是由淋巴样前体发育而来的。 无论其来源如何，pDC明显具有髓样细胞和淋巴样细胞的共同特性，这是最初定义这种细胞类型的决定性特征。

3.树突细胞的异质性

单细胞分析与传统方法的结合揭示了定义的每群经典DC亚群都有相当大的异质性。例如，非经典AXL+人DC被证明同时具有cDC和pDC特性，与之对应的老鼠也有类似的表达谱。这些DC可提呈抗原，但无法生成I型IFN，因此被认为是一种“过渡性”DC亚群。也可以用免疫调节状态而非发育谱系来区分DC异质性。例如，肺癌组织中存在功能减弱的人和小鼠树突状细胞，被定义为“富含免疫调节分子的成熟树突状细胞”（mregDC）。

4.CDs细胞抗原呈递过程

T细胞启动

激发原始CD4+T细胞的能力构成了DCs在体内和体外的一种独特而关键的功能。在游离抗原存在的情况下，DCs诱导的T辅助细胞可以与B细胞相互作用并刺激特异性抗体的产生。正如最近Flt3-L所示，体内DC数量的增加可以显著增强CD4+T细胞和抗体反应的程度。DCs在启动CD8+T细胞方面同样重要。在体外，DCs可以直接在没有T细胞帮助的情况下刺激CD8+T细胞的增殖。虽然DCs可以直接激活CD8-T细胞，但它们通常需要CD4-T细胞的帮助。除了启动外，DCs对维持原始CD4+T细胞和免疫T细胞记忆至关重要。

B淋巴细胞的调节

DCs除了激活原始T细胞外，还能直接激活原始B细胞和记忆B细胞。树突状细胞还有助于活化未成熟B细胞向浆细胞的分化。

二、B细胞

B淋巴细胞即骨髓依赖性淋巴细胞。B淋巴细胞的主要功能是产生抗体，介导体液免疫应答。此外 ，活化的B细胞还可提呈可溶性抗原。B淋巴细胞通过表面表达的高亲和力B细胞抗原受体(BCR)能有效地摄取、内化和加工抗原。B细胞通过BCR识别抗原后，形成免疫突触，将抗原提呈给MHC II类分子，这一过程受到SNARE蛋白家族成员Vamp-7的调 节 。Vamp-7与溶酶体囊泡蛋白LAMP-1+相 关，募集和停靠在B细胞的免疫突触中心。Vamp-7表达下降不改变溶酶体运输到突触界面，但局部分泌受损 ，导致B细胞摄取、处理和呈递抗原的能力下降。

1.B细胞的个体发育

B细胞来源于骨髓及胎肝中的多能造血干细胞，B细胞的发育分化进程可大致分为5个阶段：祖B细胞、前B细胞、未成熟B细胞、过渡B细胞和成 熟B细胞，前3个阶段在骨髓中进行，后 2 个阶段主要在脾脏中进行。

图1：人B细胞发育和细胞标志物 出生前，B细胞在胎儿肝脏发育；出生后，B细胞最开始在骨髓（BM）中发育。初期成熟后，B细胞迁移到脾脏或其他次级淋巴组织中以实现功能成熟。

2.B细胞的抗原呈递过程

两种活化方式

图 2.B细胞的T细胞非依赖性活化 这种类型的活化可生成浆细胞和IgM。B细胞被细菌或病毒表面的保守重复表位活化，包括脂多糖（LPS）或DNA片段。BCR识别T细胞非依赖性抗原聚集并交联。Toll样受体（TLR）提供第二信号。活化的B细胞会产生较强的抗体反应，但不会生成记忆B细胞。

图 3.T细胞依赖性B细胞活化 这种类型的活化可生成记忆和血浆B细胞。Naive B细胞与可溶性或膜结合型抗原结合，并使抗原内化。B细胞在向MHCII上呈递这种抗原，并被辅助性T细胞（Th）识别。CD40受体与配体结合需要第二种信号。Th细胞分泌细胞因子，其可促进B细胞分化为能够生成IgG、 IgA、或 IgE的成熟B细胞。

三、单核/巨噬细胞

巨噬细胞是天然免疫系统特化的，存活时间长，具有吞噬作用的细胞。它们与中性粒细胞一起，是感染的第一反应者。巨噬细胞参与细胞碎片和病原体的识别、吞噬和降解。巨噬细胞还在向T细胞提呈抗原以及诱导其他抗原呈递细胞表达共刺激分子等方面发挥作用，从而启动适应性免疫反应。此外，在炎症初期，它们通过释放细胞因子和趋化因子发挥重要作用，这些细胞因子和趋化因子反过来将其他免疫细胞募集到炎症部位。

1. 单核/巨噬细胞的发育

巨噬细胞的来源很多。驻留在组织中的巨噬细胞可以从循环单核细胞中分化出来，循环单核细胞由骨髓中的造血干细胞发育而来，也可以在胚胎发育过程中在胎肝、卵黄囊或背主动脉附近的胚胎区域生成，因此在成年期独立于单核细胞而存在。前一种发育是通过单核细胞在稳定状态下或炎症时迁移到组织中实现的，随后分化为持续性的组织特异巨噬细胞，包括骨巨噬细胞（破骨细胞）、中枢神经系统（小胶质细胞）、结缔组织（组织细胞）和肝脏（库普弗细胞），以及肺泡巨噬细胞（噬尘细胞）、肠、脾和腹膜。小胶质细胞和库普弗细胞能够在存在白细胞介素34 （IL-34）的情况下自我更新，IL-34表达于这些组织，并与巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）的受体结合。由于它们分布和作用于多种不同组织和器官中，因此巨噬细胞具有多种形态和表型。

图 1.巨噬细胞发育 单核细胞由骨髓中的造血干细胞发育而来，并经历几个分化步骤。单核细胞作为常驻单核细胞或有炎症时作为炎性单核细胞迁移到常驻组织中。迁移到组织后，分化为组织特异性巨噬细胞。

2. 巨噬细胞的活化

M1巨噬细胞主要通过天然和适应性免疫反应在Th1细胞募集、病原体抵抗和肿瘤控制中发挥作用。M1巨噬细胞通常由病原体、LPS、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和1型辅助性T （Th1）细胞因子干扰素γ（IFN-γ）活化。许多通路能促进巨噬细胞向M1极化，，包括IRF/STAT、LPS/TLR4和NF-κB/PI-3激酶通路。

从特征上说，M1巨噬细胞抗原呈递活性强和分泌促炎细胞因子多，如白细胞介素1 （IL-1）、IL-6、TNF-α、一氧化氮（NO）和活性氧（ROS）。此外，它们下调IL-12和IL-23和IL-10的表达。M1巨噬细胞的刺激导致 IL-1b、TNF-α、IL-12、IL-18和IL-23的分泌水平提高。此外，M1巨噬细胞表型表达高水平的主要组织相容性复合体II类（MHC II）、CD68、CD80和CD86，以及针对Th1细胞的趋化因子，包括CXCL9和CXCL12。

[1] ThermoFisher.树突状细胞概述[EB]/[OL]. https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home/life-science/cell-analysis/cell-analysis-learning-center/immunology-at-work/dendritic-cell-overview.html,2021.11.25

[2] Banchereau J, Briere F, Caux C, et al. Immunobiology of dendritic cells[J]. Annual review of immunology, 2000, 18(1): 767-811.

[3] ThermoFisher.B 细胞概述[EB]/[OL]. https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home/life-science/cell-analysis/cell-analysis-learning-center/immunology-at-work/b-cell-overview.html,2021.11.25

[4] 张金凤, 夏妍, 张淑云. 抗原提呈细胞的研究进展[J]. 国际检验医学杂志, 2017, 38(19): 2735-2738.

[5] ThermoFisher.巨噬细胞概述[EB]/[OL]. https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home/life-science/cell-analysis/cell-analysis-learning-center/immunology-at-work/macrophage-cell-overview.html,2021.11.25